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分析人elisa檢測試劑盒的組成以及操作過程

發(fā)布時間:2019-12-26   點擊次數(shù):1692次
   人elisa檢測試劑盒試驗是一種敏感性高,特異性強,重復性好的實驗診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便,結果判斷較客觀等因素,已廣泛應用在免疫學檢驗的各領域中。人elisa檢測試劑盒適用于體外定性檢測人血清或血漿中的抗人類戊型肝炎(HEV)病毒IgM抗體ELISA檢測。
 
  人elisa檢測試劑盒組成:
  1、30倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶
  2、酶標試劑6ml×1瓶8標準品(320μg/L)0.5ml×1瓶
  3、酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶
  4、樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份
  5、顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張
  6、顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個
 
  人elisa檢測試劑盒的操作過程:
  1、運用前,將所有試劑充沛混勻。不要使液體發(fā)生很多的泡沫,防止加樣時參加很多的氣泡,發(fā)生加樣上的差錯。
  2、依據(jù)待測樣品數(shù)量加上規(guī)范品的數(shù)量決議所需的板條數(shù)。每個規(guī)范品和空白孔主張做復孔。每個樣品依據(jù)自個的數(shù)量來定,能運用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后參加50ul于反響孔內(nèi)。
  3、參加稀釋好后的規(guī)范品50ul于反響孔、參加待測樣品50ul于反響孔內(nèi)。當即參加50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,悄悄振動混勻,37℃溫育1小時。
  4、甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗刷液,振動30秒,甩去洗刷液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。假如用洗板機洗刷,洗刷次數(shù)添加一次。
  5、每孔參加80ul的親和鏈酶素-HRP,悄悄振動混勻,37℃溫育30分鐘。
  6、甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗刷液,振動30秒,甩去洗刷液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。假如用洗板機洗刷,洗刷次數(shù)添加一次。
  7、每孔參加底物A、B各50ul,悄悄振動混勻,37℃溫育10分鐘。防止光照。
  8、取出酶標板,敏捷參加50ul停止液,參加停止液后應當即測定成果。
  9、在450nm波利益測定各孔的OD值。